С. В. Нагорнева (2010) показала, что наибольшее негативное значение для развития тяжелой аллоиммунной анемии у плодов имело отсутствие иммунопрофилактики при предыдущих беременностях, имевшихся в анамнезе матери. Так, в ее исследовании все беременные, плоды которых имели тяжелую анемию, потребовавшую внутриутробных трансфузий, не получали в прошлом иммунопрофилактику. Автор показала важную роль в развитии сенсибилизации предшествующих прерываний беременности, особенно неоднократных, происходящих на больших сроках беременности.
В настоящее время принято учитывать следующие факторы, увеличивающие риск аллоиммунизации при настоящей беременности:
• угрозу прерывания беременности, особенно если она сопровождалась наличием кровянистых выделений из половых путей;
• акушерские и экстрагенитальные заболевания, способствующие увеличению проницаемости плацентарного барьера;
• инвазивные процедуры, проведенные при беременности, особенно выполненные трансплацентарным доступом: хорионбиопсия, амниоцентез, кордоцентез. Исследования, проведенные в НИИАГ им. Д. О. Отта СЗО РАМН показали, что около 80 % беременных, плоды которых нуждались во внутриутробных и постнатальных трансфузиях, имели акушерские осложнения в течение настоящей беременности: угрозу прерывания и гестоз, в том числе осложненные плацентарной недостаточностью с развитием гипотрофии плода.
В связи с высоким риском развития или нарастания сенсибилизации у пациенток группы риска крайне нежелательно проведение инвазивной пренатальной диагностики. При наличии абсолютных показаний к этим манипуляциям методом выбора для получения плодового материала у подобных беременных следует считать кордоцентез. При этом кровь плода должна служить материалом не только для цитогенетических и/или молекулярно-генетических, но и для иммуногематологических исследований, позволяющих уточнить тяжесть аллоиммунного процесса, в том числе анемического синдрома, у плода. Данный подход к вопросу о проведении инвазивной пренатальной диагностики становится особенно принципиальным у сенсибилизированных беременных, имеющих плаценту, расположенную по передней стенке матки, поскольку инвазивная диагностика, проведенная трансплацентарным доступом, особенно значительно увеличивает тяжесть сенсибилизации.
При наружном и внутреннем акушерском обследовании у пациенток из группы риска по изоиммунизации выполняют общепринятые акушерские исследования. При этом особое внимание врача-клинициста должно быть обращено на наличие/отсутствие у беременной многоводия и отечного синдрома.
Основное значение в алгоритме диагностики аллоиммунной эритропении у плода имеют лабораторные и инструментальные методы.
Лабораторные методы
Иммуногематопогические исследования
В 1954 году A. Allen и соавторы обнаружили прямую зависимость тяжести гемолитической болезни у новорожденных и высоты суммарного титра антиэритроцитарных антител в крови матери. Такую же закономерность описали позднее Л. С. Персианинов (1959) и 3. Ф. Васильева (1972). Особенно неблагоприятные перинатальные исходы все авторы наблюдали в тех случаях, когда антитела впервые выявлялись уже в начале беременности. В результате исследований было показано, что не имеется прямой и постоянной связи между высотой суммарного титра анти-эритроцитарных антител, выявляемых в крови беременной женщины, и формой гемолитической болезни, возникающей у плода. Попытка использовать в диагностических целях динамику титра антирезусных антител в течение беременности, привела к более обнадеживающим результатам, однако она также не оказалась решающей в оценке тяжести заболевания у плода.
Вопрос о связи титра антиэритроцитарных антител у матери с тяжестью гемолитической болезни у плода является предметом дискуссии до настоящего времени. По наличию и уровню титра иммунных антител в крови женщины можно установить характер антигенных взаимосвязей матери и плода. Однако однократное исследование его уровня не достаточно точно отражает вероятность наличия гемолитической болезни у плода. Беременная, имеющая титр антиэритроцитарных антител 1:64, в такой же мере может иметь тяжелую степень заболевания плода, если титр будет сохраняться на прежнем уровне, как и беременная с возрастанием титра антител от 1:32 до 1:256 в этом же гестационном сроке.
Исследования, проведенные в НИИАГ им. Д. О. Отта СЗО РАМН, показали, что у беременных, имевших в анамнезе гемолитическую болезнь плода и новорожденного, суммарный титр антиэритроцитарных антител был достоверно выше, чем у женщин, не имевших такого анамнеза. При этом величина суммарного титра не зависела от перенесенных беременной в прошлом гинекологических и соматических заболеваний, а также акушерских осложнений данной беременности.
Удалось выявить, что высота суммарного титра антиэритроцитарных антител не коррелировала с выраженностью ультразвуковых биометрических маркеров гемолитической болезни плода, выявленных у беременной при ультразвуковом исследовании: толщиной плаценты, количеством околоплодных вод, размерами печени и селезенки плода, наличием отечного синдрома. Однако суммарный титр прямо коррелировал с величиной максимальной систолической скорости кровотока в средней мозговой артерии плода, как на протяжении беременности, так и перед родами. Кроме того, была обнаружена прямая корреляционная связь между величиной титра антител в крови матери и частотой выявления тяжелой анемии в крови плодов, полученной при кордоцентезах. Однако тяжесть анемического синдрома, обнаруженного у плода, от суммарного титра антиэритроцитарных антител не зависела. Кроме того, оптическая плотность (при длине волны 450 нм) околоплодных вод, полученных у таких беременных во время амниоцентеза, не зависела от высоты суммарного титра в крови матери.
Кроме того, в наших исследованиях установлено, что чем выше был суммарный титр антиэритроцитарных антител в крови матери, тем тяжелее было общее состояние ее новорожденного. Было обнаружено, что чем выше был суммарный титр антиэритроцитарных антител в крови беременной при первом обращении к врачу, тем раньше она была родоразрешена и тем ниже была оценка новорожденного по шкале Апгар. Число эритроцитов, значения гемоглобина и гематокрита в крови, полученной из пуповины сразу после рождения, от величины суммарного титра антиэритроцитарных антител в крови матери не зависели. Однако их величины прямо коррелировали с содержанием в пуповинной крови билирубина.
Обобщая полученные в научных исследованиях, проведенных в НИИАГ им. Д. О. Отта СЗО РАМН, данные можно заключить, что при изоиммунизации суммарный титр антиэритроцитарных антител нарастает в динамике беременности, достигая максимальных значений в третьем триместре. На фоне тяжелой аллоиммунизации самое значительное нарастание суммарного титра наблюдается после 28-й недели. При этом тяжесть сенсибилизации у беременных зависит от паритета и наличия отягощенного гемолитической болезнью плода и новорожденного анамнеза у матери. При этом, чем выше суммарный титр антиэритроцитарных антител в крови матери, тем чаще развивается у плода анемический синдром, однако степень его тяжести от высоты титра не зависит. Подобная зависимость не обнаружена у новорожденных этих женщин.
В настоящее время суммарный титр антиэритроцитарных антител принято определять всем резус-отрицательным беременным, имеющим иммуноконфликтный брак, в основном, с целью выявления у них самого факта сенсибилизации.
Всем беременным при первом обращении к врачу определяют группу крови и резус-фактор, даже если в жизни пациентки подобное исследование уже проводилось, и она имеет его заключение. При выявлении у беременной резус – отрицательной крови или О (I), А (II) или В (III) группы крови следует определить группу и резус-принадлежность крови отца для решения вопроса о принципиальной возможности развития иммуноконфликтной беременности.
Для исключения ошибок в определении этих показателей всем беременным исследования повторяют в 28–30 недель. При несовпадении результатов первого и повторного исследования кровь направляют на исследование в централизованную лабораторию или на станцию переливания крови.
Первичное определение группы крови проводят моноклональными антителами или стандартными изогемагглютинирующими сыворотками. Подтверждающее исследование проводят в лаборатории перекрестным способом на плоскости или агглютинацией в геле. Заключение о групповой принадлежности делают на основании первичного и подтверждающего исследования.
Резус-принадлежность крови беременных определяют двумя сериями реактивов анти-D-следующими методами: методом в пробирках без подогрева с использованием универсального реагента анти-D, методом агглютинации на плоскости с применением моноклональных антител, методом конглютинации в пробирках с желатином или 33 % полиглюкином, гелевым методом, антиглобулиновым тестом с использованием сыворотки анти-D (реакцией Кумбса).
