Еще одной проблемой могут стать сопутствующая инфекция или медикаментозная терапия, влияющие на функции нейтрофильных лейкоцитов. При этом возможна как их гиперактивность, так и подавление активности. В обоих случаях результаты либо невозможно воспроизвести, либо они неверны. Таким образом, пациент должен быть здоровым и до теста как минимум неделю не принимать медикаменты. У хронических больных такой тест зачастую реализовать невозможно. С научной точки зрения этот метод удовлетворителен, однако практически имеет слишком много ограничений для того, чтобы получить точные результаты.
IgG-тестирование посредством ImuPro-тестаГлавным фактором при аллергии типа III является специфический IgG, направленный на один из продуктов питания. Речь идет о выявлении определенного IgG, маркирующего антиген и делающего его узнаваемым для фагоцитов.
Если у пациента есть аллергия типа III, то в его кровообращении находятся специфические IgG против соответствующего продукта. Сам по себе IgG не делает больным, и лишь с момента употребления продукта запускается защитная реакция. Поэтому IgG — идеальный маркер для этого типа аллергии, находящийся в крови в достаточном количестве.
В сравнении с вышеописанным тестом, в данном определении наличия аллергии типа III IgG стоит на ступень выше в шкале реакций. IgG абсолютно необходим для активизации нейтрофильных лейкоцитов. Он очень стабилен и может храниться без охлаждения неделю, не искажая результат. В этом случае забранная для анализа кровь может быть даже отправлена по почте.
Поскольку функциональная составляющая в данном случае не играет роли, искажения и нарушения, вызванные сопутствующими инфекциями или приемом медикаментов, отсутствуют. Так как период полураспада IgG составляет примерно 3 недели, тест может проводиться и у пациентов, находящихся на иммуноподавляющей терапии, в случае, если она длится не более трех недель.
В качестве ограничений для определения IgG следует назвать гаммапатию, то есть неспособность к образованию антител, и так называемую моноклональную гаммапатию — болезнь, при которой вырабатываются строго определенные формы IgG-антител. При наличии одной из этих болезней тестирование нецелесообразно, так как в большинстве случаев реакция организма отсутствует.
Фактором, способным влиять на качество результатов, является и способ забора крови для анализа. Предпочтение отдается забору из вены, при котором можно получить достаточное количество крови. Менее эффективен способ взятия крови из пальца, при котором количество крови ограничено. Кроме того, при давлении на палец выжимается какое-то количество клеточной жидкости, так что концентрация IgG значительно колеблется от одного анализа к другому и влияет на качество результатов.
Итак, при выборе метода подтверждения аллергии типа III тест на наличие определенных IgG является более стабильным и надежным, чем тест на процесс активирования нейтрофилов. При ImuPro-тесте можно не опасаться неточностей из-за сопутствующих инфекций или действия медикаментов, а кровь может быть отправлена для анализа и по почте.
Порядок проведения тестированияТестирование для подтверждения наличия IgG-антител называется ELISA (Иммуноферментный анализ, сокращенно ИФА, англ. enzyme-linked immunosorbent assay). Это надежный иммунологический метод, применяемый и для определения других антител.
В нашем случае антиген — богатый протеином экстракт продукта питания, находящийся в каверне, подсоединяется к тестовой пробирке из пластика. Каждый продукт помещается в отдельную лунку. Из практических соображений используют так называемые микротитровальные пластиковые планшеты с 96 лунками. В 5 лунках, предназначеных для стандартного сравнения, находятся калибровочные растворы, с помощью которых может быть определена концентрация IgG. Определенное количество предварительно обработанной и разбавленной сыворотки крови пациента добавляется во все лунки, содержащие экстракты продуктов питания.
Если в крови пациента содержатся антитела против продуктов питания, они прикрепляются к тем продуктам питания, против которых они направлены. По истечении инкубационного времени (время между контактом и реакцией) планшеты промываются, и жидкость, находящаяся в них, удаляется. В лунках остаются прикрепленные к ним антитела. Затем добавляют второе антитело, в этот раз в каждую лунку со стандартным раствором. Оно способно распознавать только IgG-антитела человека, прикрепляясь только к IgG, соединенные с продуктами питания, и к стандартному раствору. Непомеченные продукты питания в этот раз уже не используются, а исследуемое антитело маркируется энзимом. По истечении определенного времени снова удаляют жидкость и моют планшеты. В конечном итоге остается лишь комплекс из продуктов, IgG-антител крови и маркированных IgG-антител в лунках.
Чтобы сделать эти комплексы видимыми, примешивают особый индикатор, реагирующий с энзимами маркированного антитела, которое под действием этого индикатора меняет цвет. Интенсивность цвета пропорциональна количеству образованного комплекса, который в свою очередь пропорционален содержащемуся в крови количеству IgG против соответствующих продуктов питания. С помощью калибровочной кривой можно высчитать точную концентрацию каждого специфического IgG. Посредством добавления стоп-раствора реакция останавливается и стабилизируется. В заключение содержимое планшеты измеряется с помощью разработанного специально для этой цели лазерного прибора.
Для проведения теста ImuPro300 используются 3 планшеты на каждого пациента, что соответствует 1152 каплям из пипетки. Так, в течение дня один техник-лаборант способен произвести только 20 проб.
При стандартном ImuPro— тесте разработана методика на проверку 273 продуктов питания.
Характеристика качества IgG-тестаСуществует множество важных критериев для оценки качества такого теста, одним из которых является производство антигена. При этом существует ряд нюансов, начиная от выбора продукта питания, заканчивая техникой извлечения, концентрации и сроком хранения, которые различные производители решают по-своему. Если процессы протекают не стандартизированно, то приготовление каждого последующего экстракта носит свой специфический характер, от чего страдает стандартизированность теста. По этой причине производитель обязан предоставить информацию, насколько каждая партия поставляемой продукции соотносится друг с другом.
Важным критерием является также то, осуществляется ли методика проведения тестовой системы в одной лаборатории или в нескольких. Существуют провайдеры, которые собирают анализы во всем мире для централизованного проведения и обработки результатов тестов в одной лаборатории. Эти фирмы, в основном находящиеся в США, избегают любых внешних инспекций качества. Заключение о правильности или воспроизводимости результата недоступно ни пациенту, ни лечащему врачу. Это подтвердило специальное исследование, проведенное в США в 2007 г. Некоторым из таких лабораторий были анонимно отправлены три анализа, взятые у одного и того же пациента. Теоретически результат должен был бы быть одним и тем же. Результаты тестов всех подвергнутых проверке лабораторий отличались существенными недостатками, а у двух из них были и вовсе катастрофическими.
Тестовая система, которая используется во многих странах Европы и за океаном, должна обладать соответствующими характеристиками качества, чтобы быть допущенной к применению. Лаборатории, принимающие участие в проведении подобных испытаний, должны обладать набором средств, позволяющих реализовывать их на соответствующем уровне. Данные, полученные при этом, должны по требованию предоставляться заказчику.
Сам тест представляет собой простую процедуру, выбор которой определяет сам пациент с помощью консультации своего врача: стандартный вариант ImuPro300 или же другая версия. После отправки пробы крови в лабораторию проходит примерно 10 дней до получения результатов теста, на которых основывается последующая консультация врача. И даже если поначалу все выглядит «безнадежно», существует множество возможностей изменения своих привычек питания. Для большинства непереносимых продуктов питания существует достаточно альтернатив. Большое значение отводится и распорядку дня. Во многих случаях позитивные изменения наблюдаются уже через 2–3 недели. Для дополнительного выяснения причин аллергии может иметь смысл исследование кала и/или сопутствующая терапия. Так как в проблемах со здоровьем могут играть роль одновременно различные причины, то имеет смысл провести общее обследование. Подозрение на наличие аллергии типа III дает для этого хороший повод. Зачастую этого достаточно, чтобы облегчить или совсем устранить проблемы со здоровьем. Если пациент придерживается советов врача и при необходимости предпринимает дополнительные терапевтические мероприятия, то шансы достичь нормализации состояния весьма высоки.
