Метод заключается в исследовании парных сывороток, взятых в динамике заболевания. Для постановки диагноза необходимо четырехкратное и более нарастание титра антител к возбудителям брюшного тифа и паратифов.
Методы иммунологической диагностики отличаются своей высокой чувствительностью и дороговизной, что связано со сложностями получения реактивов.
Дизентерия
Дизентерия – инфекционное заболевание, характеризующееся патогенным действием шигеллы, что проявляется нарушением функции дистального отдела толстой кишки и общей интоксикацией организма. Шигеллы, вызывающие дизентерию у человека:
1) дизентерийная шигелла – бактерии Григорьева – Шига, Штуцера – Шмитца, Лардж – Сакса;
2) шигелла Флекснера;
3) шигелла Боди;
4) шигелла Зоне.
Лабораторно-инструментальная диагностика проводится с преимуществом лабораторного компонента, как и при всех инфекциях. В большинстве случаев лабораторные исследования проводятся с целью документального подтверждения диагноза или точного определения возбудителя дизентерии и его свойств, но тем не менее являются обязательными. Это связано с яркой клиникой и характерными симптомами дизентерии, которые не вызывают сомнения в наличии дизентерийной инфекции. Исключением являются атипичные формы и хроническая дизентерия, которые ставят под сомнение диагноз и требуют проведения дифференциального диагноза с обязательным лабораторным обследованием, который может включать в себя следующие методы.
845) Бактериологическое исследование . Только этот метод позволяет выделить культуру возбудителя и изучить все его свойства вплоть до чувствительности штамма к различным антибиотикам. Недостатком является то, что вероятность высева возбудителей не превышает 80 %. Успех во многом зависит от метода посева, времени и кратности забора материала, а также среды посева и др.
846) Иммунодиагностика . Для диагностики дизентерии применяется серологический метод – реакция непрямой гемагглютинации с эритроцитарным диагностикумом (РНГА). Положительные результаты РНГА получают к концу первой недели болезни. В дальнейшем концентрация антител нарастает и снижается только спустя месяц от начала заболевания, что указывает на диапазон времени применения РНГА. Положительным является еще то, что метод высокочувствителен при наличии качественных реактивов. Минимальный диагностический титр, при котором РНГА можно считать положительной, составляет 1: 200. Методы иммуноиндикации (определения антигена возбудителя) могут по праву считаться методами экспресс-диагностики дизентерии – метод флюоресцирующих антител (МФА), РНГА с иммуноглобулиновыми (антительными) диагностикумами, иммуноферментный метод (ИФМ) и др. Они высокочувствительны, применимы при массовых обследованиях и используются в основном при эпидемических вспышках.
847) Общедоступным, технически простым, быстрым является копрологическое исследование (микроскопическое исследование кала – копроцитоскопия). С помощью этого метода не выявляют возбудителя, но получают возможность обнаружить следы его жизнедеятельности в толстом кишечнике, что вкупе с типичной клинической картиной является достаточным для постановки диагноза. При копроцитоскопии кала дизентерийного больного всегда в большом количестве обнаруживаются слизь, лейкоциты с преобладанием нейтрофилов (более 40 в поле зрения), различное количество эритроцитов (но не обязательно) и различное количество измененных эпителиальных клеток. Недостаток в том, что метод не выявляет хроническую дизентерию. Метод, вспомогательный.
4. Ректороманоскопия . Вспомогательный, но ценный метод в связи с тем, что позволяет следить за изменениями патолого анатомической картины. Основным объектом исследования при этом является слизистая оболочка сигмовидной кишки.
При дизентерии различают следующие степени поражения слизистой: катаральный, катарально-геморрагический, эрозивный, язвенный проктосигмоидиты (воспаления слизистой оболочки сигмовидной и начального отдела прямой кишки, которая является непосредственным продолжением сигмовидной). Метод не дает необходимой информации для постановки диагноза, но является бесценным дополнением к бактериологическому или иммунологическому методу. Основным недостатком является то, что метод – инструментально-эндоскопический и заключается в исследовании полости и слизистой оболочки прямой и сигмовидной кишок путем введения в них эндоскопа, что вызывает дискомфорт и даже болезненность у пациента.
5. Аллергологическая проба . Является аналогичным исследованием пробы Манту при туберкулезе. Метод основан на кожно-аллергической реакции на специфический дизентерийный аллерген (название препарата – дизентерин Цуверкалова). Метод вспомогательный, хорош при диагностике хронической дизентерии. В основе этой реакции – способность сенсибилизированного организма, т. е. получившего информацию в виде антигена, реагировать гиперемией и отеком участка кожи на месте инъекции. Иными словами, иммунитет человека, столкнувшийся с возбудителем инфекции, обязательно отреагирует выработкой специфических антител на антигены возбудителя, и даже в случае выздоровления здоровый иммунитет образует «клетки памяти», которые при следующем контакте с инфекцией оперативно реагируют и тем самым создают так называемый приобретенный естественный активный иммунитет. Но иногда из-за малой активности возбудителя болезнь клинически не проявляется, а антитела персистируют по организму и реагируют на первый попавшийся им антиген, которым является введенный внутрикожно дизентерин (туберкулин, бруциллин соответственно при туберкулезе, бруцеллезе), появляются местные реакции воспаления – покраснение, отек. Исследование очень достоверно при правильном его проведении и способно выявить хронические формы инфекции, ни чем не проявляющиеся в периоде ремиссии. Реакцию учитывают по величине отека: при отеке диаметром до 1 см ее считают сомнительной; от 1 до 3 см – слабоположительной; от 3 до 6 см – положительной; более 6 см – резко положительной.
Холера
Холера – острая кишечная инфекция (относится к особо опасным инфекциям), характеризующаяся массивной дегидратацией и потерей солей за счет неукротимых поноса и рвоты вплоть до декомпенсированного гиповолемического шока, который в большинстве случаев необратим. Заражение холерой происходит только фекально-оральным способом и чаще всего – через обсемененные холерным вибрионом водоемы.
Для диагностики холеры используют только лабораторные методы. Важно как можно скорее выявить возбудителя и поставить диагноз с назначением адекватной антибактериальной терапии, так как инфекция имеет высокую склонность к эпидемированию. Но в настоящее время созданные меры профилактики, широкое распространение и доступность антибиотиков практически исключают такую возможность. Выделяют.
1. Для скорейшего определения холерной этиологии гастроэнтерита (предварительный диагноз, объединяющий кишечные инфекции с клиникой диареи, рвоты) применяется экспрессный метод – иммунофлюоресцентный анализ (ИФА). В его основе – свечение комплекса антиген-антитело. Результат получается через 1–2 ч.
2. Ускоренные методы бактериологической диагностики холеры: реакции иммобилизации и микроагглютинации холерных вибрионов с использованием противохолерной сыворотки и фазово-контрастного микроскопа. Результат можно получить через несколько минут. Холерный вибрион не требователен к питательной среде, и культура появляется через 3–4 ч на пептонной воде. Воздействуя на культуру специфической противохолерной сывороткой, можно подтвердить холеру в случае положительного результата (метод макроагглютинации).
3. Классическое исследование – полное поэтапное обследование возбудителя . Проводится, даже если диагноз подтвердился, ускоренными и экспрессными методами. По времени занимает 36 ч. Целью является выделение чистой культуры вибриона и ее идентификация на основании изучения морфологических свойств.
На первом этапе проводят первичную бактериоскопию препаратов из каловых или рвотных жидкостей. Изучая под микроскопом окрашенные по Граму мазки, можно предположить наличие в изучаемой биологической среде холерных вибрионов.
Вторым этапом является посев и выделение культуры. Для этого материал, взятый для исследования, должен быть использован не позднее 3 ч после взятия (рвотные массы, кал).
Для посева используются среды: 1 %-ная пептонная вода (на этом этапе проводится ускоренная диагностика), 1 %-ная таурохолаттеллуритная пептонная вода, среда Мансура, среда Дьедона, агар Хоттингера, холерная среда Оксоида, ТСВ и др. После появления культуры проводят ее идентификацию по морфологическим, биологическим, тинкториальным (окраска возбудителя различными красителями) свойствам.
